خطوات تحضير بيئة الأجار المغذي:
لتحضير بيئة الأجار المغذي Nutrient Agar media اتبع الخطوات التالية:
- حضر لتر من بيئة المرق المغذى بالطريقة السابقة.
- بعد ضبط ال pH أضف 15-20 جرام من أجار، ثم ضع الوعاء في حمام مائي على درجة 100مº حتى ينصهر الأجار تماماً.
- تعبأ الأنابيب باستعمال قمع تعبيئة ويملأ 2/3 الأنبوبة للحصول على أجار العميق Deep agar أو 1/3 الأنبوبة للحصول على أجار مائل Slant وتسد الأنابيب ثم توضع فى سلة التعقيم وتعقم بجهاز الأتوكلاف ولمدة 15 دقيقة.
- بعد إخراج الأنابيب من الأتوكلاف يكون الأجار منصهراً، تترك البيئة لتبرد ويتصلب الأجار والأنابيب قائمة للحصول على أجار عميق.
وللحصول على أجار مائل تترك البيئة لتبرد ويتصلب الأجار بها وقمة الأنابيب مائلة على جسم مرتفع نسبياً فتعطى بذلك سطحاً مائلاً فى داخل الأنبوبة.
الأجار المغذي هو وسيط للأغراض العامة يدعم نمو مجموعة واسعة من الكائنات الحية غير الصعبة.
ملحوظة:
يمكن تعبئة البيئة فى زجاجات أو أطباق بترى بحسب طبيعة التجربة العملية.الأجار المغذي هو وسيط للأغراض العامة يدعم نمو مجموعة واسعة من الكائنات الحية غير الصعبة.
مكونات الأجار المغذي:
يحتوي عادةً على (الكتلة / الحجم):
- 0.5٪ ببتون: يوفر النيتروجين العضوي.
- 0.3٪ مستخلص لحوم البقر / خلاصة الخميرة: محتوى قابل للذوبان في الماء من هذه الفيتامينات والكربوهيدرات والنيتروجين والأملاح.
- 1.5٪ أجار: وهذا يعطي صلابة الخليط.
- 0.5٪ كلوريد الصوديوم: وهذا يعطي نسب الخليط مماثلة لتلك الموجودة في السيتوبلازم لمعظم الكائنات الحية.
- الماء المقطر: يعمل الماء كوسيلة نقل للمواد المختلفة للأجار.
- الرقم الهيدروجيني المعدل إلى محايد (6.8) عند 25 درجة مئوية (77 درجة فهرنهايت).
كيفية تحضير بيئة الأجار المغذي:
يتم دمج هذه المكونات وغليها لمدة دقيقة واحدة تقريبًا لضمان خلطها ثم تعقيمها بالتعقيم التلقائي، عادةً عند 121 درجة مئوية (250 درجة فهرنهايت) لمدة 15 دقيقة.
ثم يتم تبريدها إلى حوالي 50 درجة مئوية (122 درجة فهرنهايت) وتصب في أطباق بتري التي يتم تغطيتها على الفور.
وبمجرد أن تحمل الأطباق أجارًا صلبًا، يتم تخزينها رأسًا على عقب وغالبًا ما يتم تبريدها حتى تستخدم.
يتم التلقيح على أطباق دافئة بدلاً من الأطباق الباردة: إذا تم تبريده للتخزين، يجب إعادة أطباق الطعام إلى درجة حرارة الغرفة قبل التلقيح.
