نشطت عزلات الفطر herbarum C. بإنمائها على وسط PDA لمدة يوم - يومين ثم نقل جزء من المستعمرة المنشطة إلى 5 مل من الماء المقطر المعقم في أنبوب اختبار ورج جيدا ثم حسبت أعداد الخلايا الفطرية باستخدام شريحة العد Haemocytometer للحصول على تركيز 1 × 1010 خلية / مل.
استخدمت أربعة مطهرات وهي الفينول واليود و الـ Hypochloriteوالـ Cetrimide بالتراكيز التالية 5 % و 2.5 % و 1.25 % وذلك بإضافة 100 مل من الماء المقطر إلى 5 غم من المطهر للحصول على تركيز 5 % ثم سحب 10 مل من هذا التركيز بوساطة ماصة معقمة وأضيف الى 10 مل من الماء المقطر المعقم للحصول على تركيز 2.5% وكررت العملية نفسها مع هذا التركيز للحصول على تركيز 1.25 %.
حدد عدد الخلايا المختزلة حسب طريقة (Hugo and Russell,1989) حيث أضيف 0.1 مل من المعلق الفطـري الى 0.9 مل من المطهـر ليصـبح التركيز 1 × 109 خلية / مل.
وبعد مرور دقيقة واحدة ودقيقتان ونصف وخمس دقائق خفف العالق الفطري المضاف إليه المطهر بنسبة 1 / 100 لإزالة تأثير المطهر وذلك بأخذ 0.1 ما من المعلق الفطري - المطهر وإضافته الى 9.9 مل من الماء المقطر المعقم في أنبوب اختبار معقم، أخذ 0.1 مل من كل وقت من الأوقات السابقة ونشر على سطح طبق بتري معقم يحتوي على وسط PDA بوساطة قضيب زجاجي على شكل حرف L.
ثم حضنت الأطباق في الحاضنة بدرجة حرارة 25 م لمدة 5 – 7 أيام حتى يظهر النمو الفطري في طبق السيطرة.
وحسبت أعداد الخلايا الفطرية في كل طبق لكل وقت من الأوقات السابقة وقورنت مع طبق السيطرة لمعرفة الاختزال الذي حدث في أعداد المستعمرات. وحسب المعادلة التالية:
عدد الخلايا التي قتلت بتركيز ووقت معين
نسبة القتل=ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ100x
العدد الكلي للخلايا الحية
التسميات
فطريات