المحاليل المكونة لصبغة كرام.. صبغة كريستال فايولت. محلول لوجول. محلول فينول-أسيتون
المحاليل المكونة لصبغة كرام:
تتكون صبغة كرام من ثلاثة محاليل رئيسية، وهي:
- صبغة كريستال فايولت: وهي صبغة أساسية تعطي البكتيريا لونًا بنفسجيًا.
- محلول لوجول: وهو محلول يحتوي على يوديد البوتاسيوم واليود، ويتفاعل مع صبغة كريستال فايولت لتكوين صبغة معقدة مقاومة للذوبان في الماء.
- محلول فينول-أسيتون: وهو محلول يزيل الصبغة المعقدة من البكتيريا سالبة الغرام، مما يجعلها تبدو شفافة أو حمراء.
شرح المحاليل المكونة لصبغة كرام:
فيما يلي شرح لكل محلول من هذه المحاليل:
صبغة كريستال فايولت:
هي صبغة أساسية تعطي البكتيريا لونًا بنفسجيًا. تتكون من جزيء كريستال فايولت، وهو جزيء ملون يرتبط ببروتين الخلية البكتيرية.
محلول لوجول:
هو محلول يحتوي على يوديد البوتاسيوم واليود. يتفاعل اليود مع يوديد البوتاسيوم لتكوين مركب يوديد البوتاسيوم، وهو مركب أبيض غير قابل للذوبان في الماء.
محلول فينول-أسيتون:
هو محلول يحتوي على فينول وأسيتون. يزيل الفينول الصبغة المعقدة التي تتكون من صبغة كريستال فايولت واليود من البكتيريا سالبة الغرام، مما يجعلها تبدو شفافة أو حمراء.
خطوات إجراء صبغة كرام:
- تتم عملية صبغة كرام على النحو التالي:
- يتم تثبيت البكتيريا على شريحة اختبار.
- يتم تطبيق صبغة كريستال فايولت على الشريحة لمدة دقيقة واحدة.
- يتم غسل الشريحة بالماء المقطر.
- يتم تطبيق محلول لوجول على الشريحة لمدة دقيقة واحدة.
- يتم غسل الشريحة بالماء المقطر.
- يتم تطبيق محلول فينول-أسيتون لمدة 30 ثانية.
- يتم غسل الشريحة بالماء المقطر.
- يتم تجفيف الشريحة وفحصها تحت المجهر.
نتائج صبغة كرام:
تظهر البكتيريا إيجابية الغرام باللون البنفسجي، بينما تظهر البكتيريا سالبة الغرام باللون الأحمر أو الشفاف.
أهمية صبغة كرام:
تعد صبغة كرام من أهم التقنيات المستخدمة في علم الأحياء الدقيقة. فهي تساعد على تحديد نوع البكتيريا بناءً على تركيبها الخلوي.
