تصبيغ البكتريا.. طرق فحص التركيب الشكلي وتجمعات الجراثيم
تصبيغ البكتيريا: طريقة جرام
تصبيغ البكتيريا، وخاصة طريقة جرام، هي تقنية مهمة تستخدم على نطاق واسع في المختبرات لتحديد وفرز أنواع مختلفة من البكتيريا. تعتمد هذه الطريقة على اختلافات في تركيب جدار الخلية بين البكتيريا إيجابية الجرام والبكتيريا سالبة الجرام.
لماذا نقوم بتصبيغ البكتيريا؟
- التشخيص: تساعد طريقة جرام في تشخيص الأمراض البكتيرية بسرعة وفعالية. على سبيل المثال، يمكن تحديد ما إذا كانت عدوى الجهاز البولي ناتجة عن بكتيريا إيجابية الجرام أو سالبة الجرام، مما يساعد الطبيب على اختيار المضاد الحيوي المناسب.
- التصنيف: تساعد طريقة جرام في تصنيف البكتيريا لأغراض البحث العلمي.
- مراقبة فعالية المضادات الحيوية: يمكن استخدام طريقة جرام لمراقبة فعالية المضادات الحيوية على البكتيريا المعزولة.
خطوات طريقة جرام:
- تثبيت العينة:
يتم وضع عينة من البكتيريا على شريحة زجاجية وتثبيتها حراريا لمنعها من الانزلاق أثناء إجراءات التلوين.
- صبغة البنفسج البلوري:
يتم تغطية الشريحة بمحلول من صبغة البنفسج البلوري التي تتفاعل مع جميع أنواع البكتيريا وتلصق بها.
- محلول اليود:
يضاف محلول اليود الذي يعمل على تثبيت صبغة البنفسج البلوري داخل جدار الخلية.
- إزالة اللون:
تتم معالجة الشريحة بالكحول أو الأسيتون. هذه الخطوة هي الخطوة الفاصلة في طريقة جرام.
- البكتيريا إيجابية الجرام: لها جدار خلوي سميك من الببتيدوغليكان يحبس صبغة البنفسج البلوري داخل الخلية حتى مع استخدام الكحول أو الأسيتون.
- البكتيريا سالبة الجرام: لها جدار خلوي أرق يسمح للكحول أو الأسيتون بإزالة صبغة البنفسج البلوري.
- صبغة مضادة:
تتم إضافة صبغة مضادة، مثل سافرانين أو فوشين، إلى الشريحة. هذه الصبغة تلون البكتيريا سالبة الجرام التي فقدت صبغة البنفسج البلوري باللون الوردي أو الأحمر.
نتائج التلوين:
- البكتيريا إيجابية الجرام: تظهر باللون الأزرق أو البنفسجي لأنها تحتفظ بصبغة البنفسج البلوري.
- البكتيريا سالبة الجرام: تظهر باللون الوردي أو الأحمر لأنها فقدت صبغة البنفسج البلوري وتُلون بالصبغة المضادة.
ملاحظات مهمة:
- لا تُصنف جميع أنواع البكتيريا بشكل قاطع باستخدام طريقة جرام. هناك بعض البكتيريا التي تظهر نتائج متغيرة أو غير محددة.
- توجد تقنيات أخرى تُستخدم لتصنيف البكتيريا، مثل اختبارات التفاعل التسلسلي للبوليمراز (PCR) والتي تعتمد على تحليل الحمض النووي للبكتيريا.
