اختبار البروتين التفاعلي سى (CRP):
القاعدة:
البروتين التفاعلي سى (CRP) الموجود في أمصال المريض وجد مرتبطا بحالات الإصابة الحادة والحالات النخرة ومجموعة من الاضطرابات الالتهابية.
هناك ارتباط بين مستويات مصل CRP وبداية العملية الالتهابية.
مراقبة مستويات CRP في أمصال المريض تشير إلى فاعلية العلاج وتقييم تعافي المريض.
تغطى جسيمات لاتكس CRP بالأجسام المضادة إلى CRP البشري.
عند خلط مستعلق اللاتكس بالمصل الذي يحتوي على مستويات CRP مرتفعة على الشريحة، يلاحظ وجود تراص واضح خلال دقيقتين.
المادة:
1- يغطى مستعلق جسيمات لاتيكس البوليستيرين (حوالي 1%) بأجسام مضادة إلى CRP.
2- عنصر التحكم الإيجابي. المصل يحتوي على أجسام مضادة إلى CRP.
3- عنصر التحكم السلبي. مصل خالٍ من أجسام مضادة إلى CRP.
4- محراك.
5- شريحة بلاستيكية.
6- ممصات صغيرة قادرة على توزيع 50 ميكرولتر.
7- محلول ملح مساوي التوتر (0.9% كلوريد الصوديوم)
تحضير الكاشف:
تحضر جميع الكواشف عند درجة حرارة الغرفة (من 20 درجة إلى 25 درجة مئوية) وتخلط برفق لإعادة تعليق اللاتيكس قبل الاستخدام. لا تحدث الرغوة.
ينبغي تنظيف شريحة الاختبار تنظيفًا جيدًا قبل الاستخدام حيث أن آثار المنظف أو العينة السابقة قد تؤثر على النتيجة.
إجراء التنظيف الموصى به:
1- يتعين غمس البطاقات المستخدمة في محلول مطهر.
اتبع مبادئ الجهاد المصنعة للمواد المطهرة.
2- يتعين فرك دوائر التفاعل بمادة غير أكالة لضمان إزالة الجسيمات اللاصقة الممكنة.
3- اشطف تمامًا بماء مطهر.
4- اترك بطاقة التفاعل لتجف.
5- قم برش البطاقات بمحلول كحولي بنسبة 70%.
6- اترك الكحول ليتبخر قبل إعادة الاستخدام.
الإجراء:
طريقة وصفية:
1- اترك كواشف الأدوات ومصل المريض ليصل إلى درجة حرارة الغرفة.
2- انقل قطرة واحدة (50 ميكرو لتر) من مصل المريض إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3- قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4- اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5- برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
طريقة شبه كمية:
1- باستخدام محلول ملح مساوي التوتر، قم بتحضير مخففات تسلسلية لمصل المرضى (1/2، 1/4، 1/8، 1/16، 1/32، 1/64 وغيرها).
2- انقل قطرة واحدة (50 ميكرولتر) من كل مخففات المصل إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3- قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4- اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5- برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
النتائج والتفسير:
افحص شريحة الاختبار تحت مصدر ضوء قوي بعد دقيقتين.
من خلال دور اختبار، يتعين اختبار عناصر تحكم الأدوات وعينات قيم المستوى المعروفة.
من المفترض أن يعطي عنصر التحكم السلبي للأدوات نتيجة سلبية بعد دقيقتين.
من المفترض أن يعطي عنصر التحكم الإيجابي للأدوات نتيجة إيجابية عند العيار 1/4 +/- مخفف واحد مزدوج بعد دقيقتين.
إن لم تعط مستويات عناصر التحكم أو عينات المستخدمين المعروفة النتائج المتوقعة، يتعين اعتبار نتائج الاختبار غير صالحة.
طريقة وصفية:
النتيجة الإيجابية يشار إليها من خلال نمط تراص واضح للاتيكس، في محلول واضح.
النتيجة السلبية يشار إليها من خلال عدم وجود تغير في مستعلق اللاتيكس على شريحة الاختبار.
أدوات لاتيكس CRP تتمتع بحد كشف يبلغ 6 ملجم/لتر من CRP في مصل المريض.
يحصل على النتائج الإيجابية عندما يكون تركيز مصل CRP أعلى من 6 ملجم/لتر ويحصل على النتائج السلبية عندما يكون التركيز 6 ملجم/لتر أو أقل.
طريقة شبه كمية:
بعد ذلك، يحسب تركيز CRP بالمصل بالتقريب من خلال مضاعفات عامل المخفف (أي 2 أو 4 أو 8 أو 16) أو من خلال حد الكشف وهو 6، لتعطي قيمة التركيز بوحدة ملجم/لتر، على سبيل المثال إذا كان عيار التراص عند 1/8، فإن القيمة التقريبية لتركيز CRP بالمصل تكون 6 × 8 = 48 ملجم/لتر.
تم الكشف عن عيارات بقيمة 500 ملجم/لتر من خلال CRP مع عدم وجود تأثير للبروزون (الصنارة).
ليست هناك تعليقات